DNA提取概述 DNA提取分爲三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。利用研磨或者超聲破碎細胞，並通過加入去污劑以除掉膜脂。加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚／氯仿抽提，以除掉細胞內的蛋白，如與DNA結合的組蛋白。將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉澱，因爲DNA在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒。
DNA的檢測 二苯胺（DPA）指示劑能夠證明DNA的存在。在酸中加熱後，含有去氧糖的DNA水解，2-去氧核糖轉變為ω-羥基菊芋糖醛（ω-hydroxylevulinyl aldehyde），與二苯胺反應，產生藍色的化合物。DNA濃度可以利用分光光度計通過測量溶液在600nm的吸光度來計算。測量DNA純度的方法是測量DNA溶液在260和280nm的吸光度。DNA吸收260nm處的紫外光，而蛋白質吸收280nm處的。一個較純的DNA樣品應該基本不含蛋白質，因此260/280的吸光度比值應該較高。DNA也可以通過內切核酸酶切開後跑膠，與已知濃度的DNA分子量標準（marker或者ladder）對照來測定濃度。
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金線蓮：農業的傳奇作物 中興大學農機系-------陳加忠
在台灣所有的農產品中，金線蓮是屬於最傳奇的作物，傳奇的內容不僅包括它的藥效，還包括它的售價與栽培方式。個人在花卉栽培自動化技術的推廣過程中，常常遇見如下的問題1.金線蓮要如何種植？2.台灣能在平地種出金線蓮？為了解答這些問題，因此參預民間的試驗研究。此篇文章之目的在於以栽培方式與產業的觀點加以討論此項傳奇作物。金線蓮的栽培 在民間傳說中，金線蓮號稱藥王，能治百病。在報紙的新聞報導下，這種草藥被形容成可以抗癌，可治療肝病、高血壓、心臟病、糖尿病等種種疾病。而其售價也有不同的報導。鮮物價格自每台斤3000元至5000元，因而被形容為比人參昂貴的農作物。在台灣農業不景氣的時代，金線蓮為許多農民寄以希望的作物。試想，一年若有200台斤的產量，全年收入則高達60萬至100萬，實在找不到比這種作物利潤更高的農產品了。因此在兩三年前幾乎在多數的設施內，都可以看到數盤至數十盤金線蓮加試種，而國近兩百家的組織培養苗生產者，幾乎有一半以上的業者都參預了金線蓮組培苗的生產。許多組培業者同時擔任販賣瓶苗和收購成株的角色。 金線蓮的生產可分為組培苗和植株設施栽培。組培苗繁殖技術在國內研究單位與業者不斷的研發努力之下，已經是成熟的技術。規模較大的組培業者，甚至已建立種苗源庫，自行留種而維持母瓶。由於金線蓮組培苗之母瓶主要來自種子之實生苗，因此組培苗業者除了在栽培場選育成長良好的植株也努力於深山內採集野生金線蓮持續自行留種。除了品種之外，如培養基的配方各組培場亦有其獨到之處。然而培養所處的環境卻少有在空調設備的栽培室內進行，主要在於各種自然環境的設施中進行，而設施僅有遮蔭網與風扇環控設備。設備較完善的組培苗栽培場則有利用水牆與風扇，在夏天使溫室內溫度低於外界溫度。國內政府編列之推廣刊物：(農民淺說)有如下敘述：“組織培養之環境：一般金線蓮多培養在溫度22±1℃，若超過25℃以上，在瓶內發育不良，基至褐化死亡”。以國內金線蓮各組培苗場實地量測結果，夏天瓶內溫度常有高達30℃以上之情況，而瓶苗仍然茁長健壯，由此可知民間業者之組培苗生產技術，己超越了政府推廣刊物之描述。然而以目前之組培苗生產技術，仍有許多改善空間，例如縮短瓶苗生長期間，提高瓶苗的生長整齊度等。組培苗在瓶內經過馴化後，種植於設施內之栽培技術對於一般栽培者是極大的挑戰。例如成長慢。病蟲害多，存活率低，成株重量不足等，這些問題造成了在栽培過程不易成功。而且國內相關之技術資料不多，種苗繁殖場於“豐年月刊“，花蓮農改場於”花蓮區農技報導“各有一篇推廣報導，其他學術刊物如”科學農業”，“中華農學研究”也有些學術性的文章。民間則已出版售價高達兩仟元的巨書“金線蓮繁殖技術”。這些文章與資料，尚未對於金線蓮栽培提供完整資訊，以改良場之資料為例，對栽培環境與利用之設施建議內容摘錄如下：(一) 、栽培環境：光線為3000--5000lux，溫度在25℃以上氣溫下生長停頓甚至枯萎，最適宜的溫度是15-20℃。最適宜之相對濕度為75-85%。(二) 、栽培場以遮蔭網之設施為主為溫網室（防雨網室）高2.5-3.0公尺之屋頂，屋頂上下1公尺為遮蔭網。栽培場地在平地，可在地面挖淺溝或以磚塊圍成淺水槽，上覆覆膠布，貯水於水槽內，以提高空氣溫度，但是需要注意通風。(三) 、病蟲害 病蟲害有鐮刀菌、疫病菌之猝倒病，細菌軟腐病等。害蟲有蛞蝓、蝸牛、紅蜘蛛類等。(四) 、採收 平地因夏季高溫，多雨，70%以上植株易猝倒死亡，因此平地宜春秋、冬天種植，但無法越夏。以海拔600-1000公尺之地區為例，平均株重10個月約2公克，18個月3.7公克。以一年至一年半之栽培期，每公頃產量2000-3700公斤。上述栽培技術介紹中，最大的關鍵點在於設施結構與環控設備。以具有屋頂，四週有網、屋頂上下有遮蔭網的栽培設施，其主要的環控作業只有內遮蔭網的收啟。而通風作業只有憑藉外界的自然風力。但是由於四周防蟲網與遮蔭黑網的阻擋，自然風力的通風量大減，少數設施雖然加裝了機械通風扇，但是由於通氣量不足，牆壁為防蟲網的網目非氣密物質，因此風壓生了短路無法有效進行內外換氣。對大多數的設施而言，除非位處山風盛強大的地點，否則在炎夏，設施內部都處於高溫高濕狀態，各種病害叢生。而在海拔1000公尺以上的山區，幾乎有半年仍無法逃避此種內部熱累積效應。在冬季，由於以網室牆壁為主，無法以溫室效應進行內部加溫，山區之氣溫更低，因此更不利金線蓮成長。在春天多雨季節，設施內部高濕加上通風不良更容易得病。因此在遮蔭網室內真正適合種植金線蓮的季節只有秋天。此外，設施內部以淺溝，淺槽聚水以增加相對濕度。在自然蒸發狀態下，加濕效果有限。相反地導因空氣中的灰塵逐漸沈積水槽內，因而青苔叢生，形成病菌繁殖溫床，使內部病害更加嚴重。有些農民以逐次施用高濃度藥劑進行防治，不見得有防治效果，反而增加消費者疑慮。由於國內的主要栽培時期在秋天開始，此時設施內部微氣候為最適合的環境，為秋高氣爽之季節。因此剛種下後成活率很高，給予農民信心。但是冬天來臨之後低溫導至成長緩慢。春天的雨季，因高濕帶來大量病害。4-5月以後的陽光，開始產生在設施內部嚴重的熱累積，也正是病蟲害的高峰期，因此通過此整年考驗下仍然倖存植株不多，其鮮重也不足。此外侵襲金線蓮的病蟲害有太多種類，推廣刊物內列出的種類僅為其中一部份。但是由於高價位，給生產者一個期盼，一個希望。希望在於“只要能夠種得活，種得久，一定能夠賺到錢”。在金線蓮的栽培環境中，主要的爭議一點在於溫度環境。所有的推廣刊物均強調在20-25℃之溫度範圍內。以國內的大氣環境而言，僅有冬天才有此環境，而夏天以水牆降溫也只能維持溫室內部溫度於28℃。因此若以溫度為標準,國內不論平地或高山都並沒有種植金線蓮的條件，然而市場上卻見到鮮株之供應量，因此“20-25℃之生長條件”，仍有爭議存在。在經過詳細的栽培試驗後，金線蓮之適合溫度應為20-30℃，而非20-25℃。理想的金線蓮設施必須含以下的條件一、氣體環境(日照量、溫度、相對濕度等)可以適合作物；二、根部的環境（介質水份、通氣性、肥份等）適合作物；三、整體境維持在無菌，無法或是菌害，蟲害控制在一定密度之下。在國內民間的實際栽培試驗研究中，已有成功之實例。在南投縣與屏東縣的平地地區兩處試驗中，所用的溫室為以塑膠布為覆蓋物的半固定結構，不包環控設備之造價每坪低於4500元。配合遮蔭網、機械通扇、和噴霧設備，使設施內部夏天維持25-30℃之溫度。冬天維持20-25℃之溫度。噴霧設備除了夏天降溫，也可以做為加濕設備。理想濕度為75%至95%。內部光量藉由遮蔭網開閉加以調整。塑膠布溫室再搭配適切的防蟲網，以隔絕蟲類進入。進入溫室之介質，灌溉水，種苗均經過消毒或殺菌處理。依介質之水份狀態加以灌溉，並適當施用花寶肥料。在嚴謹的管理作業下，自當年九月開始種植金線蓮。到了第二年的四～五月，植株已到達可銷售階段。經過9-10月之栽培，每株鮮重平均6-8公克，較大者可高達12公克，而每一栽培盤種植88棵，每盤約有1台斤，溫室內植床上每坪可放置22個栽培盤。在一百坪溫室內，以85%的栽培空間利用率，每期產量可高達1800台斤以上。推廣手冊在農政單位之資料，傳統栽培產期18個月，每株3.7克。由此可見不同的栽培技術即有顯著不同之結果。 由民間成功的栽培個案可知，農政單位推廣手冊中所敘述之資訊（如溫度20-25℃），因時間、空間之不同，並不是絕對的栽培限制條件。在設施利用方面，揚棄“以最低成本為選用標準而採用遮雨網室”，近而利用價格合理的半固定塑膠布溫室結構與環控設備，使內部微氣候到佳調節，配合嚴謹的管理可杜絕病蟲害的侵入，如此可以使傳說中難以栽培的作物，成為工廠式的生產。由生產面積，生產季節之規劃，即可控制產量與產期。這種傳奇般作物，只要用心的研究以設施環控結合栽培技術。生產金線蓮則不再是神話，也不成問題，而真正尚待解決的問題反而在於此產品的利用與銷售。
金線蓮的利用 金線蓮的用途是什麼？每一個銷售者可以從許許多多，古今中外的醫書找到利用的記錄。例如在農林廳之“金線蓮栽培“推廣手冊的附錄內容，即有淋瑯滿目的記錄，如1924年佐佐本舜一記載治肺病、肝、脾諸臟疾患及毒蛇咬傷。嘉義市藥用植物研究會中醫師宣稱金線蓮消炎、解毒、止血降壓、強心利尿，而更列出治療急性肝炎、慢性肝炎、青春痘、大小便出血、心臟無力、高血壓、糖尿病等種種藥方。由於民間傳說中有如此廣泛的用途，因此稱之”藥王”。在嚴格的醫學研究，金線蓮研究文獻資料反而少見。通常業者提出資料不外乎台北醫學院對台灣金線蓮與高雄金線蓮的藥效比較，而實驗僅以動物試驗為主，尚未到達人體試驗之階段。由於金線蓮的使用尚未到達生物技術中成份萃取之階段，因此仍以鮮株食用或是加工成茶包，藥酒等方式。因此中藥素材尚未成為藥劑階段。目前之銷售方式大約有如下方式：一、藥用：主要的販售店為中藥店鋪或青草藥店店鋪。除了嚴重病害時（如癌症），採購後直接大量服食之外，大多數的食用方式係以中藥服用方式，與其他藥材共同煎服。二、食補 此種消費方式又可區分為鮮品與加工，鮮品係以食補方式，與其他食物共同煮食，最有名的料理即是金線蓮雞這道菜，在加工品方面有茶包、茶露與金線蓮酒等方式。不論是藥用之青草藥材或是食補用品，到底每年需求量有多少，而輸出日本又多少？農政單位推廣手冊中，估計每年需求量1000公斤，國內報紙之報導則每個月一個生產班即有一千台斤的銷售量，確實的數目至今是個迷題。因此產銷也未能夠透明化，更不用提及計劃生產。三易開罐 在國內易開罐飲料中，市場出現已以“金線蓮＊”為品名的飲料，雖然名字出現了包含“金線蓮”三個字，但是其主要成份係標稱青草抽取液，而未註明有無金線蓮原料。因此無法明瞭在此種飲料生產中，有否使用了金線蓮，更不能估算其生產時需要的原料量。
青草藥與生技工業之藥材一種中藥農產品的應用是青草藥或是中藥藥材？這是絕然不同結果。在青草藥的階段，用藥藥量屬於中醫師的估計，每一種疾病需要不需要採用此種藥材？要用多少量？這些都是尚未建立規則性，因此也未有量化的需求數目？中藥藥材是屬於現代生物技術重要的子題，自植物材料中萃取有用的成份，加以純化並進行量產，經過臨床藥理試驗，動物實驗、人體試驗等階段，並經衛生署等單位審查核準之後，才能正式成為藥物。而在藥物階段，已有較一致的標準，可對治何種病？依病人身體狀態如何給予不同的劑量，至此階段用藥技術已完成建立 自中藥之青草藥至醫學用藥物，此中有漫長、艱苦的路途。對金線蓮此項作物而言，就是缺乏此研發階段。在國科會“生物科技於農業上應用”所定出的七大項目中，藥用植物為其中一項。金線蓮在台灣的生技工業上，應有其重要地位。正也是研究主題的合適對象。日本每年透過貿易商收購乾料，但是在日本的用途未得而知，是製成健康食品銷售或進行藥物研究？若是藥物研究成功，台灣未來則是否僅為原料供應國，反而需要向外國購買昂貴之藥品。在國內所有的藥用作物中，金線蓮是種傳奇的作物，而其傳奇與爭議的項目已逐漸澄清。例如組培技術，民間產業種源採集保存、母瓶製作，繼代培養，量產繁殖等均已有一定的技術水準。在栽培技術方面，利用塑膠布溫室配合環控系統，加以細心的管理技術，可以控制病蟲害傳播與穩定產量，而其品質均能穩定。以種源的觀點，金線蓮正有其獨特地位，在中藥界上認為獨具藥效的品種有兩種：台灣金線蓮與高雄金線蓮。而兩者均是國內自有的品種。對於這種在中藥界藥效傳聞已久的藥用作物，自種源保存至量產技術均已完備，的確可稱為台灣農業界的傳奇作物。但是由於藥性研究的工作遲遲未有開展，也未完備，此作物仍屬於青草藥的地位。如何促使此項作物，研究其獨特的成份，萃取量產此成份，並成為真正醫學藥物，這才是理想中的藥用作物。在農業生產中，對於此藥用作物，己能提供生產技術，而藥效的研究需要醫學界，生物研究界加以投入。在完成藥材開發後，藥廠有了固定的原料需求，農業生產者才能夠持續的投入生產，也才能自生產，銷售中得到收入。
結語 金線蓮傳奇作物己完全了前一階段的生產技術，目前需要下一階段藥材之研究。在過去的研究試驗中，已証實利用溫室栽培技術可以進行金線蓮的量產栽培。未來的期望在於農業界以外的藥學界，生物界研究群加以投入。期望未來金線蓮此作物之藥效有了確實的結果。若是藥效得到証實，藥物鍊製需求大量的原料，台灣農業也多了一項出路
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人蔘組培的開始!!!
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觀賞鳳梨的組培繁殖!!!
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http://twbusiness.nat.gov.tw/countryPage.do?id=10&country=NL
荷蘭扼歐洲地理要衝，自古貿易及運輸業相當發達，該國小國寡民，且天然資源僅天然氣略具規模，然多年來卻能在全球經貿體系中佔得一席之地，是小而強的經貿國家。
相較於其他歐洲國家，荷蘭經濟體系的特點為「波德模式（Polder Model）」的共識與協商，是荷蘭人團結合作的核心價值。每年勞、資及政府三方共同決定的「集體協議工資（CAO）」制度，在1982年曾幫助荷蘭扭轉經濟衰退、失業率高達10%的危機（即所謂的「荷蘭病」），實為當時的奇蹟，也印證該模式的價值。
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表一 三種蘭花病毒檢測方法之比較
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方法
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ELISA
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PCR
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生物晶片
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原理
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抗體與病毒反應，以標定於抗體上之酵素因增幅作用，以顏色變化呈現
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以特殊核酸複製酶藉由短片段核酸引子快速複製病毒核酸，再進行電冰分析
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以專一性捕捉PCR產物之核酸探針固定於生物晶片，在控制條件下與PCR產物雜合反應
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靈敏性
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不佳
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最高
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為PCR十倍
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專一性
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依抗體而定
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可進行多種病毒檢測
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依晶片植入之探針種類決定
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特殊要求
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需要病毒專一性抗體
|
|
PCR操作執行需要正確
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判讀方式
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以吸光光度計判定數據呈現
|
如藉由螢光儀器進行定量分析，可量化
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以人眼判讀顏色，尚未量化
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比對之標準物質
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"無"病毒之植株
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不需要
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無
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樣本數目
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多36-384個樣本
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0.1g，極少量
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微小量
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測試環境
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一般實驗室環境，2天
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一般實驗室
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清潔等級極高的實驗室
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測試人員
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一般人員
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需要專業訓練，並且具有經驗
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高品質水準之技術人員
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操作
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簡易
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複雜
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比PCR簡易
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成本
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最低
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更高
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最高
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國際標準
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官方認可
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官方認可
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未有官方認可
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蝴蝶蘭組培 生產.管理!!!TTC
高档花卉要建10万平米/10甲温控大棚……!!!
10万平米/10甲=1,000m2X100棚
1,000m2=20Px1,000=20,000大苗/ 1,000m2棚
10万平米/10甲=20,000大苗/ 1,000m2棚x100棚=2,000,000大苗/100,000m2
100万平米/100甲= 20,000,000大苗/1000,000m2= 1,000m2X1,000棚
组培要建2000万株的组培楼:
20,000,000P=2,000,000P/Mo=66,000P/Day=50Bx20P/M Day x 66MD=66台-100台
->100台x50x20株/人= 100台x1,000株/人=100,000株/日x300D/Year=30,000,000P/Year.
母瓶/60D->中母瓶/60D->子瓶/60-90Day->出瓶.
100台x50B/人x60D-90D=500,000B/Total Bottle=/300B/ 2,000 L台=1,000m2
操作室: 100台/1,000m2
育瓶室: 500,000B/1,000m2
製瓶室: 100台x50B/人=5,000B/日=1,200B/爐X5=6,000B/Day=1,000m2
儲備室: 500,000B/1,000m2
辦公室: 其它/1,000m2 合計 : 5,000m2 *24x20=480B/爐/ˊ6萬 *8/框 *0.8/B
10万平米/10甲大苗=20,000大苗/ 1,000m2棚x100棚=2,000,000大苗/100,000m2 /10甲
10万平米/10甲瓶數=1,000m2/棚X100棚=100B/m2x1,000m2/棚X100棚=10,000,000B/10甲
10万平米/10甲DEN.= 10,000,000Bx4/Y=40,000,000B/Y=x200Gm=8,000,000Kg=8,000Ton/10甲
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*蝴蝶蘭組培教學 .全年溫室生產.管理!!!
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