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「綠盈國際花卉有限公司
 
 
「綠盈國際花卉有限公司
http://www.greenculture.com.tw/  

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上海必優生物科技有限公司概況
連絡人: 朱小姐
電話: 021-66051137/38/39

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病毒檢測技術在種苗業之應用!!!.......種苗改良繁殖場

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Real-time PCR 的精確掌握染病植株的病重程度!!!
 
 
蝴蝶蘭是台灣產值極高花卉品種,但蝴蝶蘭嵌紋病卻一直困擾花農。受到

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ELISA檢測設備 !!!TTC
 

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ELISA( enzyme-linked immunosorbent assay )酵素連結免疫吸附法!!!
自然界有許多專一性的配對分子,例如:兩股 DNA 分子間的鹼基配對、酵素與其基質間的結合與催化、各種荷爾蒙與其受體、抗原與其抗體的結合等。其中,抗原與抗體的專一性配對,可用人為的設計與免疫操作,在實驗室中取得專一性的抗體;這是目前極少數可用人工產生專一性分子探針的方法之一。抗體與抗原之間的高度專一性,一直吸引著研究學者的注意力;對於抗原抗體間的專一結合關係,免疫學家自百年前已從免疫沈澱法清楚觀察,後來又發展出雙向免疫擴散 (double diffusion),以及酵素免疫分析法 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),成為免疫化學的標準工具。這些免疫工具與方法,到現在都還應用在基礎研究,或產業界的各種檢驗及醫療用途上。ELISA是在1971年首次由EngvallPerlman所介紹。不論是測抗原或抗體都有很高的敏感性及專一性,且使用設備相較之下少了許多。固相吸附准許unbound reagents快速且完全地清洗。是一種安全又穩定的方法。

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蘭花病害診斷及綜合管理平台


沈偉強教授/國立臺灣大學植物病理與微生物學系









葉信宏副教授/國立臺灣大學植物病理與微生物學系http://obiua.bio.ncku.edu.tw/disease.aspx#







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憑藉超過20年的經驗,在植物組織培養技術,上海鼎漢生物科技有限公司(鼎漢)是亞洲領先的組織文化的傳播者之一。原名台灣華誼蘭花花園,鼎漢是總部設在中國的全面的生產設施,在上海,無錫,採用組織培養在育種和生物技術應用,傳播和大規模生產的蝴蝶蘭在中國的行業領導者。深圳市鼎漢擁有大棚面積達52,000平方米,10,000級(FS 209E)在8600萬平方米的組織培養實驗室。嚴格的質量控制協議是地方所有的蝴蝶蘭的產品和售後服務。鼎漢工作總無病毒生產鏈,實行嚴格堅持污染預防控制措施,以及在組織培養過程中應用廣泛的ELISA病毒測試程序。鼎漢保持嚴謹的政策,確保只有健康的植物被交付給客戶

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DNA提取概述  DNA提取分爲三個基本步驟,每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。利用研磨或者超聲破碎細胞,並通過加入去污劑以除掉膜脂。加入蛋白酶醋酸鹽沉澱,或者氯仿抽提,以除掉細胞內的蛋白,如與DNA結合的組蛋白。將DNA在冷乙醇異丙醇中沉澱,因爲DNA在醇中不可溶而黏在一起,這一步也能除掉鹽分。另外,目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒
DNA的檢測  二苯胺(DPA)指示劑能夠證明DNA的存在。在酸中加熱後,含有去氧糖的DNA水解,2-去氧核糖轉變為ω-羥基菊芋糖醛(ω-hydroxylevulinyl aldehyde),與二苯胺反應,產生藍色的化合物。DNA濃度可以利用分光光度計通過測量溶液在600nm的吸光度來計算。測量DNA純度的方法是測量DNA溶液在260和280nm的吸光度。DNA吸收260nm處的紫外光,而蛋白質吸收280nm處的。一個較純的DNA樣品應該基本不含蛋白質,因此260/280的吸光度比值應該較高。DNA也可以通過內切核酸酶切開後跑膠,與已知濃度的DNA分子量標準(marker或者ladder)對照來測定濃度。

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表一  三種蘭花病毒檢測方法之比較



方法



ELISA



PCR



生物晶片



原理



抗體與病毒反應,以標定於抗體上之酵素因增幅作用,以顏色變化呈現



以特殊核酸複製酶藉由短片段核酸引子快速複製病毒核酸,再進行電冰分析



以專一性捕捉PCR產物之核酸探針固定於生物晶片,在控制條件下與PCR產物雜合反應



靈敏性



不佳



最高



為PCR十倍



專一性



依抗體而定



可進行多種病毒檢測



依晶片植入之探針種類決定



特殊要求



需要病毒專一性抗體



 



PCR操作執行需要正確



判讀方式



以吸光光度計判定數據呈現



如藉由螢光儀器進行定量分析,可量化



以人眼判讀顏色,尚未量化



比對之標準物質



"無"病毒之植株



不需要





樣本數目



多36-384個樣本



0.1g,極少量



微小量



測試環境



一般實驗室環境,2天



一般實驗室



清潔等級極高的實驗室



測試人員



一般人員



需要專業訓練,並且具有經驗



高品質水準之技術人員



操作



簡易



複雜



比PCR簡易



成本



最低



更高



最高



國際標準



官方認可



官方認可



未有官方認可







 


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`西蕾麗蝴蝶蘭`林登蝴蝶蘭`柏氏蝴蝶蘭`桃紅蝴蝶蘭白瓣黃舌型`婆羅洲紫紋蝴蝶蘭`象耳蝴蝶蘭
 
 
 

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