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蘭花是我國重要花卉產業，也是台灣大宗出口物品，危害蝴蝶蘭的病 毒目前已確認達 28 種以上，影響較嚴重且國際上較為重視的病毒有東亞 蘭 嵌 紋 病 毒 (Cymbidium mosaic virus, CymMV) 、 齒 舌 蘭 輪 斑 病 毒 (Odontoflossun ringspot virus , ORSV)、胡瓜嵌紋病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)與蕃椒黃化病毒(Capsicum chlorosis virus , CaCV)。本技術內容 提供以 ISO17025 精神建立之酵素聯結免疫吸附分析法(ELISA)標準化檢驗 程序，包含上述 4 個病毒之抗體與病毒鞘蛋白抗原。其中 4 個病毒抗體各 提供 5 mL，效價為 1:1,000，檢測極限為 1 ng~10 ng; 4 病毒抗原各提供 2 mL，濃度皆大於 100 ng/mL。本案提供穩定、快速、低成本的技術與材 料，以檢測蝴蝶蘭病毒，篩選病毒感染株，提高蝴蝶蘭植株品質，增加收 益。

1.與現有一般實驗之ELISA檢測技術相比，本案是以符合ISO17025 精 神建立之標準操作方法，可快速建立國際認可的檢測制度

2.與現有之抗體比較，本案提供之一級抗體經過確效驗證，檢測靈敏 度與交叉反應皆較目前市售的抗體佳。

3.與核酸檢測技術比較，ELISA檢測技術所需的技術層面與檢測費用 較低。

1.協助蘭園進行健康植株篩選，除了可減少病害植株之栽培損失及 預防植株交叉汙染，亦可提高產品品質與價值。

2.台灣蝴蝶蘭出口由 2008 年 16 億元新台幣，至 2010 年已增加為 26 億元新台幣。國際市場預估未來蝴蝶蘭產值將超過 7 億美元(相當於約 210 億元新台幣)，市場需求與商機很大，然而這些高額的商機數據多建 立於”無病毒”植株上的需求。因此，台灣之蝴蝶蘭病毒檢測已成為產業 經營必要的趨勢與要件，也將造就蝴蝶蘭病毒檢測產業的蓬勃發展。

臺灣氣候溫暖潮溼，蘭花於生長栽培過程中，常遭受許多病原，如軟腐細菌、黃葉病菌、炭疽病菌、疫病菌，以及病毒之感染，造成花農相當之損失，並且嚴重影響外銷國際。真菌細菌病害之診斷，仍依賴傳統的分離培養與形態鑑定，除過程需時較長、無法即時提供鑑定資訊之缺點外，其敏感性低，亦需專業人員執行鑑定之工作。在植物病毒的偵測方面，目前大規模的檢測仍以“Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA)＂為主，主要在於ELISA 之準確度高，操作步驟簡單，較不會有人為產生之疏失，但蘭花病毒有時含量甚低，低於ELISA 偵測之範圍，因此利用ELISA 偵測時，易產生false negative (約15%) 的結果。因此，須以比ELISA 更靈敏之PCR 或RT-PCR 來進行偵測，但PCR 與RT-PCR 雖較靈敏，但由於植物中常含有一些抑制物質，一般進行PCR 或RT-PCR 時，須進行核酸的抽取，但核酸純化步驟繁瑣，因此時間長，成本高，且由於PCR 與RT-PCR 甚為敏感，因此微量污染即能造成false positive 的結果，而此等微量污染極易在繁瑣的核酸純化過程中產生，因此執行PCR 與RT-PCR 偵測時，亦需要高素質之人員，且難以用於大量樣品之檢測。由植物或真菌樣品快速製備DNA，利用相關病原專一性引子進行PCR 或RT-PCR，與相關技術比較起來，大幅減少了核酸抽取的步驟，步驟亦較傳統形態鑑定及ELISA 更為簡便，減少檢測所需之時間，降低檢驗人員素質之需求，大幅降低成本，並且提供快速、正確、敏感及即時的病原鑑定及監測資訊，可作為相關防治措施選擇之參考。

蘭花重要病害

真菌性病害

蘭花黃葉病或萎凋病(Yellow leaf or Fusarium wilt)
蘭花炭疽病(Anthracnose)
蘭花灰黴病(Gray mold)
蘭花白絹病(Southern blight)
蘭花疫病(Phytophthora rot)

細菌性病害

蘭花細菌性軟腐病(Soft rot)
細菌性褐斑病(Brown spot)

病毒性病害利用快速RT-PCR來鑑別感染病原協助業者建立合理化病毒病害管理體系提供快速、正確、敏感及即時的病原鑑定及監測資訊，可作為相關防治措施選擇之參考。