- Apr 29 Mon 2013 21:15
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無子櫻花大量繁殖方法!!!TTC
- Apr 28 Sun 2013 14:10
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加油!! 台灣Phal. !!!!!TTC
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http://www.youtube.com/watch?v=2JVvBDwSQ6A
http://www.youtube.com/watch?v=HoAM_Ka4bNU
- Apr 26 Fri 2013 11:45
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椰棗的分生!!!TTC
- Apr 23 Tue 2013 17:29
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霍山石斛栽培加工販售!!!TTC
- Apr 21 Sun 2013 13:03
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霍山石斛穩定的無性快繁!!!TTC
http://www.lw23.com/lunwen_776142797/
我國現有的76種石斛屬植物中,具藥用的就有40多種。其藥理主要是強陰益精、補腎益力、明目和延年益壽。霍山石斛(Dendrobium
huoshanense.CZTanget SJCheng)又名米斛,蘭科石斛屬植物,原產安徽霍山,是藥用石斛中的極品。由於石斛是一種附生植物,對生態環境要求比較嚴格,自然繁殖頻率極低(<5%),加上長期採集,野生植株已瀕臨滅絕。近年來,對藥用石斛資源進行了大量研究,特別是利用組織培養的方法對多種石斛材料進行了一定的研究,很顯然組織培養不但能挽救瀕臨滅絕的物種,而且能實現對所需求物種的快速、批量生產而滿足市場需求。但對離體條件下的遺傳穩定性和生理穩定性缺乏基礎性研究,未能獲得規範化石斛繁殖技術體系和工藝流程,從而極大的阻礙了這一名貴中草藥走向市場。本研究首次報導了霍山石斛無性快繁過程中的遺傳穩定性RAPD分析及霍山石斛的位點特異性鑑別研究結果:1.霍山石斛不同蒴果內遺傳穩定性及蒴果間的差異性:利用從20個隨機引物篩選出來的3個穩定性較好的10鹼基引物對來自五個不同蒴果的霍山石斛種群進行RAPD檢測。結果發現五個蒴果內遺傳相似係數較大,在92.5926%至100.00%之間,其中H1、H10、H9、H14存在一定程度的變異,H23是一個較為穩定的群體。五個蒴果間H1、H9、H10、H23的遺傳距離較小,H14與其它四個蒴果的則較大。說明建立霍山石斛穩定的無性快繁係是切實可行的,同時說明霍山石斛種內存在一定的變異,H14與其它蒴果的差異最大。2.霍山石斛同一蒴果內不同生長時期遺傳穩定性:利用上述3個引物對已繼代七到八次仍然維持的不同生長階段、來自同一蒴果的霍山石斛H23種群進行RAPD檢測。結果發現不同階段內遺傳相似係數較大,在85.4093%和98.3606%之間,其中在原球莖、萌芽期和一葉期存在的變異比兩葉期、開花期要顯著,但程度都極其微弱。說明來自同一蒴果的變異非常小,用組織培養的方法建立霍山石斛穩定的無性快繁係是切實可行的。3.
2,4-D、6-BA、IBA、NAA對霍山石斛試管苗分化及對其遺傳穩定性的.
- Apr 20 Sat 2013 13:36
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春去春回知多少!!!! TTC
- Apr 13 Sat 2013 12:53
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春天的櫻花!!!TTC
- Apr 11 Thu 2013 09:25
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多分離柱高速逆流色譜儀--深圳市同田生化技術有限公司!!!
- Apr 10 Wed 2013 00:04
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subject:"蔡大川教授: 您懂得以下的東西嗎? 組培式-牛樟苗"?????
- Apr 08 Mon 2013 20:06
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逆流色譜操作經驗HPLC的泵、檢測器是否可以和HSCCC聯用!!!
逆流色譜操作經驗分享 : 高速逆流色譜屬於逆流色譜的範疇，逆流色譜是一種新型的分離手段，它的主要分離原理是利用樣品在固定相和流動相之間的差異也就是分配比不同而進行分離的，值得注意的是逆流色譜的固定相和流動相都是液體，其主要優點是沒有傳統色譜的死吸附，樣品的回收率高等特點。逆流色譜源於逆流分溶法，也就是用實驗室經常使用的分液漏斗進行連續的液液萃取，根據樣品在兩種互不相溶的溶劑中分配比不同而進行分離。逆流色譜早期發展的方法有液滴逆流色譜，旋轉小室逆流色譜等。但是作為一種分離手段，早期發展的逆流色譜不能滿足高效快速的分離，分離的周期很長，效率很低。在70年代，Ito博士成功開發了一種能夠高效快速分離的逆流色譜－高速逆流色譜。但高速逆流色譜也有很多種設計，經過幾十年的發展，現在的高速逆流色譜一般是採用同步行星式的設計，其主要是利用在高速旋轉狀態產生的二維離心力場的作用下使兩種互不相溶的溶劑快速有效的對流或分割----或者說混合或分層，從而使樣品能夠在短時間內進行成千上萬次萃取，根據樣品中的物質分配係數的不同而進行分離的一種方法。HSCCC有幾個突出優點：（1）無不可逆吸附。聚四氟乙烯管中的固定相無需載體液-液色譜系統，故而消除了氣-液和固-液色譜中因使用載體而帶來的吸附現象，特別適於分離極性物質和生物活性物質；（2）高回收率。由於流動相和固定相均為液體，樣品可全部回收，分離純化與製備可同步完成，故特別適於製備性分離；（3 ）操作簡便。因固定相為液體，體系更換與平衡方便、快捷。與HPLC相比，HSCCC進樣量較大，最多可達數克，是HPLC的數百倍；與常壓、低壓色譜相比，HSCCC的分離能力強，有些樣品經一次分離即得到1個甚至多個單體，且分離時間短，數小時即可完成，純度多在98％以上。高速逆流色譜作為一種比較新穎的分離方法，影響因素主要有溶劑體系的選擇，旋轉速度，流動相的流速，溫度等影響。溶劑體系選擇即條件的摸索，相當於傳統色譜摸流動相的條件，不同的是高速逆流色譜條件的摸索主要是指樣品在固定相和流動相兩者之間的分配的比值，待分離的樣品的K值最好在0.6-1.5範圍之內，這樣才會有一個好分離效果。轉速主要體現在固定相的保留率上，一般轉速越高固定相保留率也比較高，分離效果也相對的好一些。流速要適中，太大會降低固定相保留率，太低會容易拖尾。溫度是一個非常重要的參數，溫度恆定對體係得重複性有著決定性的影響，比如說冬天，夏天可能同一個溶劑體係就會有著不同的分離效果。高速逆流色譜在藥物領域主要應用在中草藥，合成藥物，抗生素以及蛋白等領域。在天然產物中應用的更廣泛一些，比如生物鹼、黃酮、香豆素，蒽醌，皂苷，萜類等都有相應的研究。對於每一類的化合物一般都有一些經典的體系，比如說生物鹼用氯仿：甲醇：水（酸水），或者用正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水。在低極性的化合物象揮髮油，萜類可以用正己烷：甲醇：水，石油醚：甲醇：水等體系，皂苷一般用乙酸乙酯：正丁醇：水體系。以上我介紹了選擇溶劑系統的一般步驟，主要是查文獻-摸條件-上高速逆流主機-篩選優化體系這幾個步驟。摸條件和上機作實驗是最關鍵的。其實每一類型化合物都有一些比較固定的體系，比如說生物鹼類化合物你可以用氯仿：甲醇：酸水的體系，也可以用正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水的體系，還有人用正己烷：正丁醇：水的體系成功分離了石杉鹼甲。具體哪個體系適合，就要看你樣品的具體性質來判定。摸索體係對於初學者可能會比較慢，我覺得慢也不是一件壞事，畢竟是一個經驗積累的過程。摸索條件主要是判斷要的組分的分配係數如何，一般會選在一個比較合適的位置，（0.6-1.5）我們可以通過把體系加入試管當中，然後加入樣品，觀察上下相的顏色，最好在通過薄層看一下斑點大小（取等量的上下相點板）。值得注意的事，選擇體系的時候一般要注意最好先選擇比較經典的體系或者固定相的保留率高的體系。（判斷的一個標準就是上下兩相的比重相差越大，保留一般就會高，最好拿個試管看所選體系的分相時間，最好是小於30秒）比如說氯仿：甲醇：水=4：3：2，正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水=1：1：1：1，乙酸乙酯：正丁醇：水=4：1：5體系。氯仿：甲醇：水系統比較適合中等以上極性物質的分離，如果是酸水的話還可以用來生物鹼的分離。正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水適合分離低，中等極性的物質，根據化合物不同極性作比例的調整。乙酸乙酯：正丁醇：水主要用一些極性比較大化合物的分離。在選擇體系的時候也要注意上下相的比例，一般都是採用輕相做固定相，如果所選擇體系上相很多，下相較少的話，就會比較浪費。關於體系的優化就是為了尋求一個更好的分離效果，這個相對來說比較容易些，可以根據選擇的體系進行比例的調整或者在加入少量的其他溶劑，主要手段就是為了尋求一個更合適的分配係數。除了 體系的調整以外還可以進行流速和溫度的調整來選擇一個比較合適的溶劑系統。Q: 分離皂苷時用的什麼溶劑系統，什麼檢測方式呢？我用的是乙酸乙酯：正丁醇：水的體系，連接的檢測器是ELSD，像有些皂苷類，甾醇類的沒有紫外吸收的，我們一般用ELSD檢測器。分離一些水溶性的物質，我們會加入一些正丁醇，由於正丁醇本身的粘度比較大，所以體系會有一些不穩定，我們一般會把流速降低來增加體系的穩定性以求獲得好的分離效果。如果水溶性更大的，我們可以在體系當中繼續加少量的甲醇，來獲得一個滿意的分配係數.當然分離水溶性的物質我們也可以採用氯仿甲醇水的體系，這個時候甲醇的量應該是比較大的，我看過有體系用氯仿甲醇水分離過黃酮苷類的物質，如果分離效果還不是很明顯的，就是說分離物質在氯仿層的溶解度不是很大的話，我們也可以在體系中加入一些少量的正丁醇，調整一下分配係數，這樣就會有一些好的分離效果.當然甲醇有的時候也可以換成乙醇，有的時候用乙醇能獲得一個比較好的分離效果。其實丙酮也能用來分離，但是如果用紫外檢測器的話，可能丙酮由於末端吸收會干擾物質的信號在逆流色譜當中用的不是非常多。如果用的檢測器是ELSD的話這樣丙酮就可以使用。Q: HPLC的泵、檢測器是否可以和HSCCC聯用？主要要考慮的因素是什麼呢？HPLC的泵理論上是可以跟HSCCC連用的，但要注意，由於HPLC的泵是耐高壓的，而HSCCC所用的管材是塑料的，經不起高壓，所以在聯用的時候一定要注意，不要讓管路堵塞了。另外要注意HPLC的泵在不接柱的情況下的泵壓，我曾見過有人用安捷倫的泵接HSCCC，結果爆管了，一檢查，泵一工作壓力就有4MP。HPLC的檢測器與HSCCC的聯用有如下問題要注意，HSCCC上的樣品較雜，我們知道，HSCCC的管路直徑有1.5厘米，有些許不溶物進入管路不影響分離，但HPLC檢測器流通池的容積只有5-8微升，這樣就有堵塞的可能，一旦堵塞，要么爆管，要么爆流通池。另外HSCCC所用的試劑都是AR的，用HPLC檢測器檢測靈敏度太高，而HSCCC分離的樣品量也較大，HPLC的檢測器的量程可能不夠。還有就是HSCCC所用的兩相溶劑，在運動過程中產生劇烈的混合，因而溶劑不可避免的要產生一些乳化，甚至會產生一些流失，這樣HPLC檢測器得到的圖譜會非常的難看。高速逆流色譜在醫藥領域的使用範圍，總結一下有： 1、中藥領域（應用比較廣泛，生物鹼，黃酮，香豆素，糖苷等分離較多，水溶性很大的物質報導的不多）。 2、抗生素領域，有相關的文獻報導。（據我了解，已經有些人在這方面做了很多的研究） 3、蛋白質類物質，雙水相體系分離用逆流色譜分離的文獻報導不多。
這種分類其實是不完全的，因為分離可以應用到很多方面，比如說分離藥物代謝產物方面也是一種方向。逆流色譜對於製備分離內源性物質也有著自己的優勢。因為本身的代謝產物含量少，富集分離困難，高速逆流色譜由於具有高回收率等，樣品預處理簡單等特點，能夠快速的富集到相應的產物，然後再作進一步的分離。
- Apr 08 Mon 2013 20:03
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逆流色譜技術的發展!!!
第1章逆流色譜技術的發展概述1 1.1現代色譜技術的發展1 1.2液液色譜的起源2 1.3早期的逆流色譜裝置（儀器） 3 1.4高速逆流色譜的發展4 1.5高速逆流色譜的應用研究概況5 參考文獻7 第2章逆流色譜的技術原理9 2.1流體靜力平衡體系（HSES）
9 2.1.1基本模型9 2.1.2以HSES為基礎的逆流色譜儀10 2.2流體動力平衡體系（HDES）
14 2.2 .1基本模型14 2.2.2以HDES為基礎的逆流色譜儀17 2.3小結22 參考文獻23 第3章高速逆流色譜的技術原理24 3.1引言24 3.2單向性流體動力平衡逆流色譜原理25 3.3高速逆流色譜儀設計26 3.4 Ⅳ型同步行星式運動加速度分析30 3.5溶劑系統中兩相在轉動管柱裡的流體動力學分佈33 3.5.1運動螺旋管裡的流體動力學特徵33 3.5.2相分佈圖的研究34 3.5.3影響相分佈的各個物理參量36 參考文獻40 第4章正交軸逆流色譜儀41 4.1儀器的設計原理41 4.2正交軸儀器的同步行星式運動加速度分析44 4.2.1作用於支持件中心平面上的加速度45 4.2.2作用於支持件上任一點的加速度47 4.3正交軸型儀器同軸螺旋管內相分佈特性49 4.4正交軸逆流色譜儀的操作條件優化54 4.5正交軸型CPC的應用舉例55 4.6小結58 參考文獻58 第5章高速逆流色譜的特殊技術59 5.1雙向逆流色譜59 5.1.1概述59 5.1.2雙向逆流色譜的原理和機制59 5.1.3雙向逆流色譜的應用61 5.2泡沫逆流色譜法及其應用63 5.3用在J型CPC上的螺線型固體圓盤柱組件系統64 5.4 pH?區帶精製逆流色譜67 5.4.1 pH?區帶精製逆流色譜的分離原理67 5.4.2 pH?區帶精製逆流色譜的分類68 5.4.3 pH?區帶精製逆流色譜分離的準備及操作69 5.4.4 pH?區帶精製逆流色譜的優點和局限性71 5.4 .5典型pH?區帶精製逆流色譜的應用72 5.4.6親和分離pH?區帶精製逆流色譜的應用76 參考文獻79 第6章高速逆流色譜的工作方法81 6.1
HSCCC的溶劑系統選擇81 6.1 .1 HSCCC的溶劑系統的要求82 6.1.2影響HSCCC分離的因素83
6.1.3選擇HSCCC的溶劑系統的步驟83 6.1.4
HSCCC的溶劑系統的選擇方法83 6.1.5一種實用的溶劑系統選擇思路86 6.2高速逆流色譜的工作步驟87 6.2.1溶劑系統的準備87 6.2.2柱系統的準備與運行87 6.2.3樣品溶液的製備和進樣87 6.2.4 HSCCC分離和檢測88 6.2.5清洗分離柱90 6.2.6注意事項90 參考文獻91
第7章HSCCC在天然植物有效成分分離中的應用93 7.1生物鹼類化合物的分離94 7.1.1概述94 7.1.2辣椒生物鹼95 7.1.3蓮子心生物鹼96 7.1.4吳茱萸生物鹼99 7.1.5雷公藤生物鹼101 7.1.6黃連生物鹼102 7.1.7黃花烏頭生物鹼105 7.1.8夏天無生物鹼107 7.1.9駱駝蓬生物鹼109 7.1. 10防己生物鹼111 7.1. 11苦參生物鹼111 7.1. 12小結1 14 7.2黃酮類化合物的分離1 15 7.2.1概述1 15 7.2.2橘皮黃酮1 16 7.2.3牡丹花黃酮1 18 7.2.4葛根黃酮1 20 7.2.5淫羊藿黃酮1 22 7.2.6厚果雞血藤異黃酮1 23 7.2.7大豆異黃酮1 25 7.2.8藤黃雙黃酮1 27 7.2. 9黃芩黃酮1 28 7.2. 10小結130 7.3植物多酚化合物的分離131 7.3.1概述131 7.3.2丁香多酚132 7.3.3金銀花多酚133 7.3.4石榴多酚137 7.3.5菝葜多酚138 7.3.6紫錐菊多酚140 7.3.7茶葉多酚143 7.3.8花青素145 7.3.9小結147 7.4木脂素類化合物的分離150 7.4.1概述150 7.4.2厚朴木脂素151 7.4.3芝麻木脂素152 7.4.4五味子木脂素154 7.4.5丹參木脂素158 7.4.6牛蒡子木脂素158 7.4.7連翹木脂素160 7.4.8肉蓯蓉木脂素162 7.4.9小結165 7.5香豆素類化合物的分離166 7.5.1概述166 7.5.2補骨脂香豆素167 7.5.3蛇床子香豆素169 7.5.4羌活香豆素170 7.5.5秦皮香豆素172 7.5.6白芷香豆素173 7.5.7盤龍參香豆素177 7.5.8小結179 7.6醌類化合物的分離180 7.6.1概述180 7.6.2紫草醌類化合物181 7.6. 3大黃蒽醌化合物182 7.6.4虎杖醌類化合物186 7.6.5丹參醌類化合物186 7.6.6蘆薈蒽醌化合物190 7.6.7何首烏蒽醌化合物192 7.6.8小結194 7.7萜類化合物的分離194 7.7.1概述194 7.7.2柿葉萜類化合物195 7.7.3雷公藤萜類化合物196 7.7.4甘草萜類化合物198 7.7.5穿心蓮萜類化合物199 7.7.6甜瓜萜類化合物201 7.7.7番茄萜類化合物201 7.7.8銀杏葉萜類化合物204 7.7.9冬凌草萜類化合物204 7.7. 10蘋果皮萜類化合物206 7.7. 11赤芍萜類化合物206 7.7. 12梔子苷萜類化合物207 7.7. 13小結2 10 7.8皂苷類化合物的分離2 10 7.8.1概述2 10 7.8.2苦瓜皂苷2 11 7.8.3三七皂苷2 12 7.8.4人參皂苷2 14 7.8.5小結2 16 7.9其他類化合物的分離2 17 7.9.1當歸內酯2 18 7.9.2太子參環肽2 18 7.9.3香附酮2 20 7.9.4葡萄籽脂肪酸222 參考文獻2 25 第8章HSCCC在抗生素分離中的應用2 28 8.1概述2 28 8.2高速逆流色譜分離抗生素的實例230 8.2.1鏈孢毒素230 8.2.2環孢菌素231 8.2.3紅黴素232 8.2.4螺旋黴素234 8.2. 5抗真菌抗生素236 8.3小結239 參考文獻239 第9章HSCCC在海洋生物活性成分分離中的應用241 9.1概述241 9.2 HSCCC分離海洋生物活性成分的應用實例244 9.2.1葉綠素244 9.2.2蝦青素244 9.2.3葉黃素246 9.2.4斑蝥黃質248 9.2.5角鯊烯250 9.2.6苔蘚蟲素251 9.2.7聚醚類毒素252 9.3小結253 參考文獻254
第10章逆流色譜在生物大分子分離中的應用255 10.1概述255 10.2雙水相聚合物體系的構成與選擇257 10.3製備分離應用舉例258 10.3.1羊肚菌糖蛋白的分離258 10.3.2枸杞糖肽的分離260 10.3. 3嘌呤核苷酸磷酸化酶的分離260 10.3.4卵白蛋白的分離261 10.3.5質粒DNA的分離264
10.4小結265 參考文獻266 第11章HSCCC在無機離子分離中的應用267
11.1概述267 11.2 DHDECMP逆流色譜體系267
11.3 DCPDTPI的逆流色譜體系268 11.4 TOPO逆流色譜體系269 11.5 EHPA逆流色譜體系270 11.6 DEHPA逆流色譜體系271 11.7 B2EHP逆流色譜體系272 11.8 DMDBDDEMA逆流色譜體系272 11.9 Tetraoctylethylenediamine逆流色譜體系273 參考文獻273 第12章HSCCC在生物醫藥產業中的應用及發展趨勢275 12.1 HSCCC在天然藥用成分及標準樣品製備中的應用275 12.2
HSCCC在新藥先導化合物的發現和篩選中的應用279 12.3高速逆流色譜指紋圖譜281 12.4逆流色譜的發展趨勢284 12.4.1逆流色譜藥物的工業化放大284 12.4.2 HSCCC的微型化及同多種分析技術的聯用284 12.4.3
HSCCC在生物大分子分離中的應用285 12.4. 4逆流色譜技術應用領域的拓展286 12.5結束語286 參考文獻287
附錄HSCCC分離天然植物活性成分常用溶劑體系一覽表288
- Apr 08 Mon 2013 20:01
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逆流色譜技術Countercurrent Chromatigraphy(ccc)!!!
