鐵皮石斛不同生長階段遺傳穩定性的RAPD分析

上海師範大學學報（自然科學版）2005年02期劉石泉李小軍余慶波周根餘LIU Shi-quanLI Xiao-junYU Qing-boZHOU Gen-yu

利用從20個隨機引物篩選出來的3個穩定性較好的10堿基引物對已繼代12到13次仍然維持在不同生長階段、來自同一蒴果的鐵皮石斛T31種群進行RAPD檢測其遺傳穩定性.發現不同生長階段內遺傳相似係數較高,在89.36％和100％之間,其中原球莖期的變異比萌芽期、一葉期、兩葉期、開花期要顯著,但程度都極其微弱.

霍山石斛及相似種的位點特異性PCR鑒別

Allele-specific diagnostic PCR authentication of Dendrobium huoshanense and its allied species of Dendrobium Sw.

<<中草藥 >>2006年01期
劉石泉 , 李小軍 , 余慶波 , 周根餘 , LIU Shi-quan , LI Xiao-jun , YU Qing-bo , ZHOU Gen-yu

目的設計出霍山石斛的位點特異性鑒別引物,僅通過PCR就能對霍山石斛的真偽進行準確鑒別.方法利用石斛屬植物基因庫中rDNA ITS序列資料庫進行同源性比較,在與霍山石斛差異較大的區段設計1對特異性引物,然後對19份石斛屬植物DNA範本進行PCR擴增,陽性者即為霍山石斛正品.結果發現在退火溫度為60℃時,該引物能把霍山石斛的範本從19份石斛屬植物中擴增出來,而其他的石斛屬植物均為陰性.結論運用位點特異性鑒別引物成功地對霍山石斛進行PCR鑒別,該鑒別反應重現性好,能在霍山石斛鑒別時發揮重要的作用,與形態學、DNA測序等鑒別方法相比,該方法具有高效、準確、簡便、省時等優點.

鐵皮石斛不同繁殖代數遺傳穩定性RAPD的研究

Study on Hereditary Stability for Dendrobium o f ficinale et Migo of Different Descends

<<江南大學學報（自然科學版） >>2005年05期
劉石泉 , 李小軍 , 周根餘 , LIU Shi-quan , LI Xiao-jun , ZHOU Gen-yu

研究鐵皮石斛單蒴果種子內不同無性繁殖代數的遺傳穩定性.利用從100個隨機引物篩選出23個穩定性較好的10堿基引物,對來自單蒴果的7代無性繁殖種苗進行RAPD檢測.發現7代無性繁殖的組培苗內代代之間遺傳距離很小,但代數相差越大其遺傳距離就越大,在0～0.043 5範圍內.其中在1～3代未探查到變異,但從第4代始,有部分引物RAPD帶型發生變化,但變化甚微.23個穩定引物只探查到了7個變異位點.鐵皮石斛組培過程中種記憶體在一定的變異,但變異甚微,所以建立鐵皮石斛穩定的無性快繁體系是切實可行的.

鐵皮石斛不同生長階段遺傳穩定性的RAPD分析

Analysis on Genetic Stability for different development stages of Dendrobium officinale Kimura et Migo by RAPD

<<上海師範大學學報（自然科學版） >>2005年02期
劉石泉 , 李小軍 , 余慶波 , 周根餘 , LIU Shi-quan , LI Xiao-jun , YU Qing-bo , ZHOU Gen-yu

利用從20個隨機引物篩選出來的3個穩定性較好的10堿基引物對已繼代12到13次仍然維持在不同生長階段、來自同一蒴果的鐵皮石斛T31種群進行RAPD檢測其遺傳穩定性.發現不同生長階段內遺傳相似係數較高,在89.36％和100％之間,其中原球莖期的變異比萌芽期、一葉期、兩葉期、開花期要顯著,但程度都極其微弱.

香蕉提取物對霍山石斛原球莖增殖的影響

Effects of extract from banana on the propagation of protocorm-like bodies of Dendrobium huoshanense

<<上海師範大學學報（自然科學版） >>2004年04期
李小軍 , 劉石泉 , 路群 , 余慶波 , 周根餘

報導了香蕉提取物的濃度和添加方式對霍山石斛原球莖增殖的影響.結果表明,1/2MS附加5％～10％香蕉提取物適宜霍山石斛原球莖增殖.

石斛的分子生物學鑒定--基於RAPD分析

RAPD - BASED MOLECULAR IDENTIFICATION OF DENDROBIUM SPECIES

<<西南農業大學學報（自然科學版） >>2004年04期
彭銳 , 李泉森 , 李隆雲

利用隨機擴增多態性DNA(RAPD)技術分析了15種石斛屬藥用植物,選用10個有效引物(10 bp)擴增出99條DNA片段,用於遺傳多樣性分析、構建UPGMA聚類圖.分析結果表明:RAPD方法能有效鑒別所試石斛屬植物,其多態位點百分率為84.85％,表現出豐富的遺傳多樣性.

曲莖石斛及其近似種鑒別的形態和DNA分子證據

MORPHOLOGICAL AND DNA MOLECULAR EVIDENCE FOR AUTHENTICATION OF DENDROBIUM FLEXICAULE FROM ITS ALLIED SPECIES OF DENDROBIUM

<<藥學學報 >>2001年11期
周開亞 , 王崢濤 , 徐紅 , 徐珞珊 , 丁小餘

目的探討曲莖石斛(南陽居群)與同屬近似種:細莖石斛(南陽居群)、霍山石斛(霍山居群)、鐵皮石斛(天臺居群)藥材鑒別的形態及DNA分子證據.方法對曲莖石斛(南陽居群)及其近似種的藥材進行了外部形態和rDNA ITS序列比較.結果曲莖石斛及其近似種藥材的外部形態雖無明顯區別,但在rDNA ITS序列上卻存在著顯著而穩定的差異.曲莖石斛(南陽居群)與鐵皮石斛(天臺居群)的rDNA ITS序列的差異最小,絕對遺傳距離為7;但與細莖石斛(南陽居群)及霍山石斛(霍山居群)rDNA ITS區的差異較大,絕對遺傳距離分別為40和42.在rDNA ITS區域中,作者共挑選了7個堿基位點用作鑒別曲莖石斛( 南陽居群)及其近似種的DNA證據.結論根據藥材的形態特徵及rDNA ITS區堿基序列差異,可準確鑒別曲莖石斛及其近似種藥材.

利用RAPD分析13種石斛屬植物的遺傳多樣性和親緣關係

Analysis of genetic diversity and affinity relationships among 13 species of Dendrobium Sw. by RAPD

<<中草藥 >>2006年04期
盧江傑 , 施農農 , 應奇才 , 王慧中 , WANG Hui-zhong , LU Jiang-jie , SHI Nong-nong , YING Qi-cai

目的通過對13種石斛屬植物進行遺傳多樣性和親緣關係分析,為更好地開發利用石斛資源奠定基礎.方法隨機擴增多態性DNA(RAPD)技術分析遺傳多樣性,UPGMA類平均法進行聚類分析.結果利用篩選出的10個隨機引物對供試材料DNA進行隨機擴增,共得到188條帶,其中多態性帶有180條,多態性百分率為95.74％.採用UPGMA類平均法對擴增出的譜帶進行遺傳聚類分析,得出反映各種間親緣關係的樹狀圖.在遺傳距離(D)=0.63處,可將供試材料分為3類,RAPD對基因組的分析結果與傳統分類學的結果差異不大.結論該標記技術對石斛屬植物的遺傳多樣性和分類研究是可行的.

Effects of extract from bananas on the growth of plants of Dendrobium huoshanense

<<江蘇大學學報（自然科學版） >>2004年06期
李小軍 , 劉石泉 , 潘維陵 , 沈世緣 , 周根餘

研究了不同香蕉品種的提取物及其添加方式和品質分數對霍山石斛試管苗壯苗的影響,並對香蕉上清液的可溶性糖品質濃度進行了檢測.結果表明:當1/2MS附加品質分數為20％菲律賓香蕉上清液時,對霍山石斛試管苗壯苗的促進作用最佳,而且试管苗可溶性糖质量浓度也最高,附加海南香蕉时促进作用次之,广东芝麻香蕉作用效果最差,这与三种香蕉品种可溶性糖质量浓度高低的检测结果相一致.