期刊-核心期刊 ISSN : 1007-7146(2004)05-0345-04
本文研究了霍山三种石斛生长期的内源激素GA、ABA的变化与茎高生长的相互关系.结果表明:霍山三种石斛茎高生长与内源GA含量呈显著正相关,与内源ABA含量呈显著负相关.合适的GA/ABA比值是影响石斛茎高生长的重要因素.霍山三种石斛中的矮生品种米斛的内源GA含量尽管也较高,但其内源ABA含量一直维持较高水平,尤其生长后期迅速上升,GA/ABA含量比值低可能是其茎高生长缓慢的原因之一.
以霍山石斛试管苗带节的茎段为材料,研究不同激素组合对霍山石斛原球茎诱导的影响,并比较4种不同培养方式对霍山石斛原球茎增殖的影响.结果表明,生长物质2,4-D是霍山石斛原球茎诱导的关键因子,霍山石斛原球茎诱导的适宜培养基为Knudson+2,4-D 0.1 mg·L-1+KT 0.05 mg·L-1;霍山石斛原球茎增殖培养阶段,主要采用液体振荡培养方式,适时转接于固体培养基上交替培养,调节原球茎生长状态,采用这种改进的培养方式生产的原球茎可用于生物反应器的大规模培养.
为提高霍山石斛的繁殖系数,对霍山石斛试管播种苗组培快繁技术进行了试验研究.结果表明:不同的植物激素及其浓度组合、培养基中糖的含量、pH值等因素对霍山石斛试管苗的生长及继代增殖有很大的影响.其中,以MS为基本培养基,添加植物激素KT 3m g/L、2,4-D 0.2 m g/L、糖3%,pH值5.4,对促进试管苗生长和继代增殖的效果最佳;而试管苗出瓶移栽的最佳基质为树皮块,其次为椰壳糠.
探讨了霍山3种石斛的生长节律及其与生态因子的关系.结果表明:3种石斛生长发育的物候期有明显的差别,米斛新茎的生长集中在3月下旬～8月份,新茎生长期150 d左右;铁皮石斛生长集中在4月下旬～9月下旬,新茎生长期154 d左右,而铜皮石斛生长则集中于4月初～9月初,新茎生长期160 d左右.米斛生长只有一个生长高峰,而铁皮石斛和铜皮石斛生长有双峰现象.石斛虽然是一种生长在高山的阴生植物,但霍山3种石斛全年生长要求一定积温和温度.米斛年积温2070℃,铁皮石斛年积温2256℃,铜皮石斛年积温2248℃.米斛和铜皮石斛生长的最适温度20℃.而铁皮石斛生长的最适温度23℃.8月份温度渐低,当温度回落又可适宜生长时,铁皮石斛和铜皮石斛还有一次小的生长过程,但是米斛仅有一次生长高峰.湿度和光强与生长负相关.适宜的降水也是石斛生长的必要条件.
目的:比较研究霍山石斛的F1代与其亲本的生长量、有效成分和生理特性等差别,探讨霍山石斛杂交利用的可能性,筛选保持较高有效成分且产量高的新资源.方法:测定霍山石斛F1代与其亲本的生长量和有效成分,光合特性、内源激素含量和同工酶谱.结果:F1代的光合面积大、叶绿素含量高、chla/b比值低,净光合速度高,生长量高于亲本米斛,接近亲本铜皮石斛,产量略高于2亲本;同时保持较高有效成分,有效成分高于亲本铜皮石斛,接近亲本米斛.F1代结合了2亲本的优点.结论:霍山石斛F1代的生理特性和产量、品质得到极大改善,可以通过种间杂交的方法对霍山石斛进行种质改良.
目的:对霍山石斛杂交种与其亲本进行生长、生理指标及主要药效成分含量的比较,为霍山石斛种质资源改良提供理论依据.方法:叶绿素含量用无水乙醇法,光合速率用CI-310便携式光合作用测定系统测定;多糖含量用浓硫酸-苯酚比色法,总生物碱含量用溴甲酚绿酸性染料比色法测定.结果:杂交种生长量积累表现为近铜皮石斛的特性,较霍山石斛有极大优势;一年生杂交种叶绿素含量及光合速率均极显著高于其亲本;杂交种二年茎与三年茎多糖含量和总生物碱含量均与霍山石斛接近.结论:杂交种在生长和药效成分积累方面结合了2个亲本之间的优势,具有很大的开发利用前景.
目的:考察霍山石斛原球茎在液体培养中增殖、水溶性多糖与总生物碱积累的特征.方法:在霍山石斛试管苗茎段原球茎诱导与继代培养的基础上,进行原球茎的液体悬浮培养,分析原球茎生长动态,用比色法测定水溶性多糖与总生物碱的含量.结果:霍山石斛茎段在NAA或NAA与KT组合的MS培养基上可诱导出原球茎,MS基本培养基最适合原球茎继代培养增殖;原球茎在液体悬浮培养中最大比生长速率0.044 * d-1,倍增时间15.8 d,最适生长周期为4周,水溶性多糖和总生物碱含量分别是3.75%和0.0261%.结论:霍山石斛原球茎液体培养生长良好,具有目的化学成分的合成能力,为发酵培养开发霍山石斛资源提供可能.
试验,筛选出的最适培养基为1/ 2M S+ 0.2 m g/LKT+ 0.2 m g/L NAA+ 0.3 m g/L 6-BA.4个因子对霍山石斛丛生芽诱导的影响顺序依次为:KT＞基本培养基＞6-BA＞NAA,其中,KT对霍山石斛丛生芽的诱导效果极为显著.添加不同浓度的生长素及香蕉泥进行生根诱导,其生根效果排序为:香蕉泥＞IBA＞NAA,最佳的生根培养基是MS基本培养基添加20﹪香蕉泥,生根率可达94.3﹪.
目的:研究稀土元素镧(La)、钐(Sm)、铱(Ye)对霍山石斛试管苗生长的影响.方法:运用植物组织培养技术在基本培养基中添加不同种类、不同浓度的稀土元素,60d后统计其对霍山石斛试管苗各项生长指标.结果:1/ 2M S+10%香蕉培养基中添加10mg/L Sm、 10m g/L Ye对其试管苗有矮化作用和促使密集的分蘖和生根;添加10mg/L La促进植株增高、鲜重增加、叶绿素含量提高:芽分化加快、根数目增多、;而添加100mg/L La且对其试管苗生长起明显抑制作用.结论:稀土元素对霍山石斛试管苗的生长有显著的影响.
机引物中筛选出10种扩增条带清晰、稳定的随机引物,通过PCR扩增共获得250条DNA片段,其中呈多态性的片段数为165条,占扩增条带数的66%,显示了霍山来源的石斛植物具有较高的遗传多态性;利用NT-syspc分析软件对不同石斛品种间的平均遗传距离进行了分析,并利用UPGMA聚类分析方法构建它们的亲缘关系聚类图,结果表明4种霍山来源的石斛品种具有较近的亲缘关系,它们之间的平均遗传相似系数为o.63,其中铁皮石斛和铜皮石斛的亲缘关系最近,两者间的遗传相似系数为0.78,它们与串珠石斛的遗传相似系数分别为0.6和0.61,与霍山石斛的遗传相似系数分别为0.63和0.58;但是,相对于形态接近的铜皮石斛,铁皮石斛与霍山石斛的亲缘关系更近.
目的 研究继代周期对霍山石斛试管苗长势及培养基成分的影响,确定最佳的继代周期时间.方法 测定不同继代周期试管苗的株高、分蘖数、鲜质量、叶绿素量及培养基pH、含水量、含糖量的变化,并计算石斛试管苗生长所需的培养基和其他的成本.结果 继代周期为40 d,试管苗的株高比继代前增加了282.86%,分蘖数比继代前增加了3.5倍,试管苗的鲜质量最大,叶绿素的量趋于最大值;培养基的含水量、可溶性糖的量最低;pH＜4.75,已不适合石斛试管苗的生长,石斛苗生长所需成本较低.结论 40 d为霍山石斛试管苗生长的最佳继代周期.就植物细胞分裂素(BA)和生长素(NAA、IBA、IAA)对石斛兰组织培养的影响进行了研究.试验结果表明:石斛兰继代培养适宜的BA和NAA浓度都为0.5 mg/L;而石斛兰试管苗的根诱导以生长素IAA为好,IAA适宜的浓度为1.0～2.0mg/L.
研究了不同香蕉品种的提取物及其添加方式和质量分数对霍山石斛试管苗壮苗的影响,并对香蕉上清液的可溶性糖质量浓度进行了检测.结果表明:当1/ 2M S附加质量分数为20%菲律宾香蕉上清液时,对霍山石斛试管苗壮苗的促进作用最佳,而且试管苗可溶性糖质量浓度也最高,附加海南香蕉时促进作用次之,广东芝麻香蕉作用效果最差,这与三种香蕉品种可溶性糖质量浓度高低的检测结果相一致.
目的研究不同生长调节物质和有机添加物对霍山石斛原球茎试管再生苗生根的影响.方法将试管苗分别培养在添加不同浓度的NAA,IBA,BA,KT,香蕉泥或氨基酸的MS基本培养基中诱导生根,观察并统计试管苗生根状况.结果不同NAA,IBA,BA,KT,香蕉泥或氨基酸添加浓度对试管苗生根率、根长、生根数及长势的影响有明显差异,它们的适合浓度分别为0.2,0.1,0.8, 0.8 m g/L,20%和0.1%.结论NAA,IBA和香蕉泥对霍山石斛原球茎试管再生苗生根影响较大;氨基酸,BA和KT对生根作用不明显;KT有持绿作用.
目的 研究继代周期对霍山石斛试管苗长势及培养基成分的影响,确定最佳的继代周期时间.方法 测定不同继代周期试管苗的株高、分蘖数、鲜质量、叶绿素量及培养基pH、含水量、含糖量的变化,并计算石斛试管苗生长所需的培养基和其他的成本.结果 继代周期为40 d,试管苗的株高比继代前增加了282.86%,分蘖数比继代前增加了3.5倍,试管苗的鲜质量最大,叶绿素的量趋于最大值;培养基的含水量、可溶性糖的量最低;pH＜4.75,已不适合石斛试管苗的生长,石斛苗生长所需成本较低.结论 40 d为霍山石斛试管苗生长的最佳继代周期.
以霍山石斛试管苗带节的茎段为材料,研究不同激素组合对霍山石斛原球茎诱导的影响,并比较4种不同培养方式对霍山石斛原球茎增殖的影响.结果表明,生长物质2,4-D是霍山石斛原球茎诱导的关键因子,霍山石斛原球茎诱导的适宜培养基为Knudson+2,4-D 0.1 mg·L-1+KT 0.05 mg·L-1;霍山石斛原球茎增殖培养阶段,主要采用液体振荡培养方式,适时转接于固体培养基上交替培养,调节原球茎生长状态,采用这种改进的培养方式生产的原球茎可用于生物反应器的大规模培养.
目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑.[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响.[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高.[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好.
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