大花惠蘭的繁殖
作者用不同濃度的大量元素及NAA和BA的組合來研究大花惠蘭的繁殖係數.試驗結果表明:以2MS+BA 1.0m g/L照+NAA 0.2m g/L+糖20mg/L+瓊脂7g/L為分生培養基,有利於提高大花惠蘭的繁殖係數,以1/ 2M S+BA 0.3m g/L+NAA 0.7m g/L+糖30g/L+瓊脂7g/L為生根培養基,生根率可達84.1%.
綜述了國內在大花蕙蘭的組織培養和快速繁殖技術方面的研究進展,包括外植體的選擇,不同基本培養基、激素、添加物對大花蕙蘭增殖與分化的影響,原球莖繼代的切割方式和褐化的防治,以及生根壯苗的方法等,並提出了大花蕙蘭種苗生產上存在的問題及產業化體系構建的設想.
用植物的組織培養法,採用五個處理,對大花蕙蘭的原球莖增殖情況進行研究.結果表明:G1+BA 0.5m g·L-1+NAA 0.5m g·L-1對原球莖的增殖效果最好,僅加BA 2m g·L-1有利於原球莖的生長.在繼代培養30d後轉瓶可以更好地達到快速繁殖的目的.
採用莖尖誘導原球莖的方法對大花蕙蘭"瀑布"進行初代組織培養,結果表明,最適誘導培養基為MS,最佳消毒方式是用0.1%的升汞處理10 min,對大花蕙蘭的原球莖誘導和增殖及幼苗分化的作用極顯著.
以大花蕙蘭的莖尖為外植體,探討了不同培養基對原球莖增殖、分化和小苗誘導及壯苗生根的影響.結果表明:1) 大花蕙蘭組織培養的原球莖誘導和增殖都可以用培養基1/ 2M S+ BA 1.0 m g/L + NAA 0.5 m g/L;2)適合大花蕙蘭組織培養原球莖芽苗誘導的培養基配方為1/ 2M S+BA 1.5 m g/L +NAA 0.5 m g/L;3)適合大花蕙蘭壯苗生根的培養基配方為 1/ 2M S+NAA 0.1 m g/L +GA 1.0 m g/L的組合.
[目的]篩選適宜原球莖一步成苗的培養基,探討原球莖試管苗的快繁移栽技術.[方法]以大花蕙蘭(Cymbidium grandiflorum)幼嫩芽為外植體進行組織培養研究.以MS為基本培養基附加不同的激素,分別設計5種配方的原球莖誘導培養基和3種配方的原球莖一步成苗培養基,原球莖一步成苗的最適培養基.用農用鏈黴素稀釋2 500～3 500倍對原球莖試管進行消毒後,栽入不同的基質,研究原球莖試管苗的移栽技術.[結果]大花惠蘭在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L配方培養基上誘導原球莖效果最好.試管苗的快繁以MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L的培養基為最適,21 d後原球莖大量增殖和分化,誘導出叢生芽並生根.在腐殖土中適當使用農用鏈黴素有利於練苗成功.[結論]該試驗探究出原球莖從增殖,誘導分化到生根只用一種培養基,大大縮短生產週期,但其生根率只有75﹪,需做進一步研究.
通過對大花蕙蘭的組織培養試驗,篩選出B5+BA1.0+2,4-D2.0的組合對大花蕙蘭花梗誘導類原球莖有明顯作用.B5培養基較MS培養基更容易誘導花梗產生類原球莖.激素BA濃度在1.0～5.0 mg/L之間,2,4-D濃度在0.5～2.0 mg/L之間有利於誘導花梗產生類原球莖.篩選出MS+BA1.0+NAA0.5的組合對大花蕙蘭類原球莖增殖有明顯作用
大花蕙蘭離體快速繁殖方法
大花蕙蘭離體快速繁殖方法，其方法為：（１）在１～３月上旬，取大惠蘭新芽，經滅菌，接種到固體培養基上，獲得試管苗；（２）切去試管苗根系，取基部小切塊，接種在固體培養基上培養約一個月，誘導出原球莖，將原球莖取下，在原部位繼續產生新原球莖；（３）原球莖在液體和固體培養基上交替培養，快速增殖形成原球莖團；（４）將原球莖切開，轉接到固體培養基上分化植株，再從基部切下，轉接到固體培養基上培養約一個月，形成完整植株即可移載到大棚或溫室。本發明成活率高、不受季節限制、效果穩定、成本低、出現變異機率小。
作者用不同濃度的大量元素及NAA和BA的組合來研究大花惠蘭的繁殖係數.試驗結果表明:以2MS+BA 1.0m g/L照+NAA 0.2m g/L+糖20mg/L+瓊脂7g/L為分生培養基,有利於提高大花惠蘭的繁殖係數,以1/ 2M S+BA 0.3m g/L+NAA 0.7m g/L+糖30g/L+瓊脂7g/L為生根培養基,生根率可達84.1%.大花惠蘭離體培養研究發現繁殖用最佳培養基配方為2 MS+BA 1.0m g/L+NAA 0.2 m g/L+瓊脂7g/L,生根用最佳培養基配方為1/ 2M S+BA 0.3m g/L+NAA 0.7m g/L+糖30g/L+瓊脂7g/L.在大花蕙蘭組培快繁過程中,植物激素對原球莖的誘導、增殖及幼苗的分化有顯著影響.細胞分裂素6-BA和生長素NAA最佳配比對大花蕙蘭組織培養很重要,尤其是細胞分裂素影響較大.
採用大花蕙蘭的試管苗和原球莖作材料.以MS培養基或1/ 2M S為基本培養基,比較不同濃度的BA對大花蕙蘭試管苗和原球莖增殖的影響,以及不同濃度的NAA對大花蕙蘭試管苗生根的影響.試驗結果表明:大花蕙蘭原球莖增殖與分化的最佳培養基為(1/ 2M S+NAA 0.2m g/L+BA 1.0 m g/L),原球莖增殖率達363.16%,芽分化率達到68.42%;其試管苗增殖的最佳培養基為(MS+NAA 0.2m g/L+香蕉汁100g/L+BA 0.5m g/L),芽增殖率達到91.67%;大花蕙蘭試管苗生根的最佳培養基為(1/ 2M S+NAA 0.5m g/L),平均每株生根數為2.60條.
以大花蕙蘭試管苗基部切塊為外植體,以MS培養基為基本培養基,培養誘導類原球莖(PLB),研究不同激素配比以及外植體來源基因型對PLB誘導的影響.低水準的2,4-D和較高水準的6-BA對於試管苗基部切塊誘導PLB具有顯著的促進作用.當2,4-D濃度高於0.60 mg·L-1時,PLB誘導受到顯著抑制.不同基因型有不同的最佳激素組合.NAA對特定基因型誘導PLB有效.以試管苗基部切塊組織培養方式誘導大花蕙蘭PLB是可行的,為轉基因研究提供了植株再生技術基礎.
取大花蕙蘭的腋芽為材料,對大花蕙蘭一步成苗的組培快繁技術進行了研究.結果表明:Ms+6-BA 1 m g/L+NAA 0.1 m g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L是大花蕙蘭一步成苗的最適培養基,增殖的同時可獲得健壯的再生植株.
在大花蕙蘭組培快繁過程中,細胞分裂素BA和KT對類原球莖誘導有極顯著影響,ZT的作用不明顯;BA和生長素NAA均對類原球莖的誘導和增殖起明顯的促進作用,且BA對大花蕙蘭幼苗的增殖效果更為顯著.類原球莖誘導分化過程中所需的蔗糖濃度相對較低.GA和香蕉泥的合理組配是大花蕙蘭生根壯苗的關鍵.試驗結果表明,大花蕙蘭試管苗玻璃化的原因主要有3個:一是培養溫度的突然升高,造成高溫傷害的後遺症,引發玻璃化;二是經過多次繼代培養,原球莖過多吸收細胞分裂素6-BA,使體內激素比例嚴重失調,導致玻璃化;三是長期使用氨、錳、鐵、鋅等含量較低的……
以大花蕙蘭(Cymbidium)試管苗為試驗植物材料,以樹脂膜容器(CP)和玻璃培養瓶作為培養容器,比較不同培養方式對大花蕙蘭試管苗生長的影響.結果表明,與常規玻璃培養容器相比,以岩棉塊作為培養基支持體,並配合CP使用的培養方式(CP·RW)對促進大花蕙蘭試管苗生長效果顯著.以野生春蘭(Cymbidium goeringii)為母本,大花蕙蘭(C.hybridium)為父本進行雜交,由雜交種子獲得800多個春蘭×大花蕙蘭雜種原球莖無性系.其中一個雜種株系的原球莖繼代培養2個月後,形成肉眼可見的花蕾.誘導花芽形成的最適激素組合為6-BA 1.0 m g/L+NAA 0.1m g/L,總花芽形成率達31%.誘導花芽形成的最適材料為1～2cm幼苗,花芽形成率達19%.
大花蕙蘭組培苗落地前煉苗3～5天,可提高成活率6.7%～13.4%,不同栽培基質影響大花蕙蘭組培苗的落地成活率,水苔是較為理想的移栽基質,其移栽後3個月成活率達86.7%.瓶苗移栽後澆水時切忌過幹或過濕,等新根長出每週宜進行一次根外追肥.
利用組織培養技術對大花蕙蘭的芽進行誘導,從4種培養基中篩選出1/ 2M S+NAA 0.4 m g/L+6-BA 1.5 m g/L的培養基為最優的芽誘導培養基.同時,利用不同基質和營養液進行試管苗的移栽和速生栽培,得出以苔蘚為移栽基質的大花蕙蘭的成活率最高,達100%.無土栽培中用大量元素為Ca(NO3)2 472 m g/L+KNO3 809 m g/L+(NH4)2HPO4 153 m g/L+MgSO4 493 m g/L的營養液配方澆灌大花蕙蘭,明顯促進大花蕙蘭的生長.
應用組織培養和快速繁殖技術對最適大花蕙蘭培養的培養基、激素、培養方式、培養基質等進行了篩選.結果表明,在含有2.0mg/L6-苄氨基腺嘌呤的改良MS培養基中,以液體振盪培養最有利於原球莖的增殖;改良MS培養基+ 0.3m g/L萘乙酸有利於試管苗的生根;在腐殖土:棉子殼=3:2(體積比)下移栽的成活率最高.
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